Abstract:
Η πράξη: "ΘΑΛΗΣ–ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΙΩΑΝΝΙΝΩΝ-Μελέτη μοριακών μηχανισμών μεταγωγής ενδοκυττάριων σημάτων μέσω οξειδο-αναγωγικών τροποποιήσεων καταλοίπων κυστεΐνης: Ο ρόλος των ιόντων σιδήρου" θα εκτελεστεί ως εξής: Υποέργο 1: «Μελέτη μοριακών μηχανισμών μεταγωγής ενδοκυττάριων σημάτων μέσω οξειδο-αναγωγικών τροποποιήσεων καταλοίπων κυστεΐνης: Ο ρόλος των ιόντων σιδήρου».
Σκοπός: Να εξεταστεί λεπτομερώς ο ρόλος του σιδήρου στο μηχανισμό με τον οποίο το Η2Ο2 επάγει τη μεταγωγή σημάτων που οδηγούν τα κύτταρα σε απόπτωση.
Στόχοι:
- Διερεύνηση του ρόλου του σιδήρου στη διαδικασία πρόκλησης απόπτωσης από το H2O2 και τον TNF-a, σε κύτταρα που ρυθμίζουν τα ενδοκυττάρια επίπεδα σιδήρου.
- Ανίχνευση δισουλφιδικών δεσμών σε φωσφατάσες των MAP κινασών σε συνθήκες οξειδωτικού στρες και μελέτη του ρόλου του σιδήρου σε αυτές τις αντιδράσεις.
- Επικύρωση του ρόλου του σιδήρου στην οξειδοαναγωγική ρύθμιση των θειορεδοξινών και γλουταρεδοξινών, που οδηγεί στην ενεργοποίηση της ASK1 σε συνθήκες οξειδωτικού στρες και μετά από έκθεση σε TNF-α.
- Ταυτοποίηση λειτουργικών μοτίβων κυστεϊνών που μπορούν να υποστούν οξειδωτικές τροποποιήσεις.
- Ανάπτυξη πρωτεομικών τεχνικών για την ταυτοποίηση πρωτεϊνών και καταλοίπων κυστεΐνης που οξειδώνονται σε συνθήκες οξειδωτικού στρες.
Ειδικότερα θα εκτελεστούν οι ακόλουθες Δράσεις:
- Ανάπτυξη γενετικά τροποποιημένων κυτταρικών σειρών που μπορούν και ρυθμίζουν τον ενδοκυττάριο σίδηρο.
- Μελέτη του ρόλου του σιδήρου στην απόπτωση μετά από έκθεση σε Η2Ο2 είτε σε TNF-α.
- Ανίχνευση δισουλφιδικών δεσμών σε φωσφατάσες των MAP κινασών σε συνθήκες οξειδωτικού στρες.
- Επικύρωση του ρόλου του σιδήρου στην οξειδοαναγωγική ρύθμιση της δράσης των θειορεδοξινών και γλουταρεδοξινών.
- Ταυτοποίηση οξειδωμένων πρωτεϊνών και καταλοίπων κυστεΐνης, με φασματοφωτομετρία μάζας.
- Κατασκευή βάσης δεδομένων και ταυτοποίηση λειτουργικών μοτίβων κυστεϊνών που μπορούν να υποστούν οξειδωτικές τροποποιήσεις.
- Διάχυση αποτελεσμάτων.
- Συντονισμός και αξιολόγηση.